目前普遍認(rèn)為，糖尿病是腦梗死的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素，其合并腦梗死的相對危險(xiǎn)程度是非糖尿病患者的2-3倍。由于近年來老年人口的不斷增多，糖尿病患者的比例逐年上升，2型糖尿病合并腦梗死已成為當(dāng)前嚴(yán)重危害人類生命與健康的常見病，其發(fā)病后癥狀重、預(yù)后差、死亡率高，給社會和家庭帶來的沉重負(fù)擔(dān)已越來越引起學(xué)者的關(guān)注。目前雖已有各種類型藥物用于臨床，但療效均不理想。

      半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡蛋白酶級聯(lián)反應(yīng)的必經(jīng)之路，在各種因素啟動的凋亡程序中起最后樞紐作用。有研究報(bào)導(dǎo)在超負(fù)荷血糖或胰島素缺乏條件下，Caspase-3參與了2型糖尿病加重腦缺血再灌注后海馬神經(jīng)元損傷的病理過程，推測Caspase-3介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡機(jī)制可能是2型糖尿病加重腦缺血再灌注海馬神經(jīng)元損傷的機(jī)制之一。

     JAK/STAT途徑是一條重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞因子信號中扮演著十分重要的角色。這種途徑通過穿膜受體將細(xì)胞外多肽信號信息直接傳送到核內(nèi)的靶基因啟動子，發(fā)揮信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子與基因轉(zhuǎn)錄活化子蛋白的雙重作用，是一種不需要第二信使的比較簡單的轉(zhuǎn)錄化轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制。腦缺血時(shí)能引起大量細(xì)胞因子和生長因子的釋放，這些因子能夠激活JAK/STAT信號通路，現(xiàn)已證實(shí)腦缺血可以誘導(dǎo)STAT1蛋白表達(dá)增加，使JAK/STAT信號通路激活。腦缺血能誘導(dǎo)磷酸化STAT1蛋白活化及核轉(zhuǎn)位，它們通過調(diào)節(jié)與凋亡和細(xì)胞死亡相關(guān)蛋白Caspase-3的轉(zhuǎn)錄與磷酸化參與了缺血性腦損傷的過程。

     原花青素(PC)具有抗氧化、降低毛細(xì)血管通透性和對心血管具有多種藥理作用。其含有大量活性酚羥基使其具有很強(qiáng)的抗氧化及清除各種活性氧自由基的能力，從藥理機(jī)制和腦血管病發(fā)病機(jī)制上看，PC對缺血性腦血管病應(yīng)有較好的作用。

     本實(shí)驗(yàn)建立在上述研究的基礎(chǔ)之上，利用2型糖尿病局灶性腦缺血大鼠模型，PC為干預(yù)手段，觀察2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血術(shù)后24h的神經(jīng)行為學(xué)評分，腦組織病理形態(tài)學(xué)變化，及免疫組化法觀察腦組織STAT1，Caspase-3蛋白表達(dá)的變化。進(jìn)一步探討PC對2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 我們的結(jié)論是：2型糖尿病能加重缺血性腦損傷，PC對2型糖尿病局灶性腦缺血大鼠具有神經(jīng)保護(hù)作用，其機(jī)制可能使通過降低STAT1蛋白的表達(dá)，影響JAK/STAT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，進(jìn)而減少Caspase-3表達(dá)，最終抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。

     實(shí)驗(yàn)結(jié)果已撰寫成論文發(fā)表于SCI收錄雜Neuroendocrinology Letters： Song CG, Yang X, Min LQ, Liu CX, Zhao CS. The effect of procyanidin on expression of STAT1 in type 2 diabetes mellitus SD rats with focal cerebral ischemia. Neuroendocrinol Lett.2014; 35(1):68-72. 主要科技創(chuàng)新

     本實(shí)驗(yàn)對建立2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血模型及在此基礎(chǔ)上的藥物干預(yù)進(jìn)行了研究,本2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血模型更接近于臨床。腦缺血后可以有多種途徑最終通過Caspase-3實(shí)現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，包括JAK/STAT信號通路，本實(shí)驗(yàn)從PC是否通過影響JAK/STAT信號通路導(dǎo)致凋亡基因Caspase-3減少最終實(shí)現(xiàn)腦保護(hù)作用的角度進(jìn)行了研究，目前國際上未見相關(guān)研究報(bào)道，具有很強(qiáng)的創(chuàng)新性。查新點(diǎn)所述“原花青素（PC）通過影響JAK/STAT信號通路導(dǎo)致凋亡基因Caspase-3減少最終實(shí)現(xiàn)對2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血模型的腦保護(hù)作用”，雖然，文獻(xiàn)1-5分別提及了原花青素對2型糖尿病SD大鼠局灶性腦缺血具有保護(hù)作用，但未見提及“原花青素通過影響JAK/STAT信號通路導(dǎo)致凋亡基因Caspase-3減少”來實(shí)現(xiàn)對2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血模型的腦保護(hù)作用；文獻(xiàn)6、7為該查新委托人（本溪市中心醫(yī)院 宋程光）所著文獻(xiàn)。

     結(jié)論如下：關(guān)于原花青素對2型糖尿病SD大鼠局灶性腦缺血具有保護(hù)作用，已分別有文獻(xiàn)報(bào)道。但該委托單位完成的以查新點(diǎn)[原花青素（PC）通過影響JAK/STAT信號通路導(dǎo)致凋亡基因Caspase-3減少最終實(shí)現(xiàn)對2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血模型的腦保護(hù)作用]為主要特征的“原花青素對2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血保護(hù)作用的研究”，未見國內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道。

     本研究探討原花青素(PC)對2型糖尿病局灶性腦缺血大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及其可能的機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

     我們選用健康Sprague-Dawley大鼠雌雄各半，隨機(jī)分為正常大鼠單純?nèi)毖M，2型糖尿病單純?nèi)毖M，PC三個(gè)劑量組(PC-1、2、3組，分別以PC粉劑50mg/kg.次、100mg/kg.次、200mg/kg.次)。制作2型糖尿病大鼠局灶性腦缺血模型，進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評分，HE染色，免疫組化SABC染色法對信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)、凋亡級聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵蛋白酶-半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)進(jìn)行定量分析，統(tǒng)計(jì)大鼠缺血側(cè)大腦皮質(zhì)缺血半暗帶區(qū)每高倍鏡視野STAT1和Caspase-3蛋白的陽性細(xì)胞數(shù)。 與正常大鼠單純?nèi)毖M比較：2型糖尿病單純?nèi)毖M大鼠腦組織STAT1、Caspase-3 陽性細(xì)胞數(shù)增多，神經(jīng)行為學(xué)評分明顯升高(P<0.01)，HE染色示神經(jīng)細(xì)胞受損明顯；與2型糖尿病單純?nèi)毖M比較：PC-1、2、3組均能使STAT1、Caspase-3 蛋白表達(dá)減少，神經(jīng)行為學(xué)評分降低(P<0.01)，改善神經(jīng)細(xì)胞的受損程度，其中PC-2、3組較PC-1組作用更明顯(P<0.01)，但PC-2、3組間無明顯差異(P >0.05)。

     我們的結(jié)論是：2型糖尿病能加重缺血性腦損傷，PC對2型糖尿病局灶性腦缺血大鼠具有神經(jīng)保護(hù)作用，其機(jī)制可能使通過降低STAT1蛋白的表達(dá)，影響JAK/STAT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，進(jìn)而減少Caspase-3表達(dá)，最終抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)。目前國際上尚未見相關(guān)研究報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果已撰寫成論文發(fā)表于SCI收錄雜志Neuroendocrinology Letters： Song CG, Yang X, Min LQ, Liu CX, Zhao CS. The effect of procyanidin on expression of STAT1 in type 2 diabetes mellitus SD rats with focal cerebral ischemia. Neuroendocrinol Lett.2014; 35(1):68-72.